levitra bitcoin

+7(495) 123-XXXX  г. Москва

 

 

 

 

 

ВАС ПРИВЕТСТВУЕТ

VIP Studio ИНФО

 

Публикация Ваших Материалов

Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Phasellus rutrum, libero id imperdiet elementum, nunc quam gravida mi, vehicula euismod magna lacus ornare mauris. Proin euismod scelerisque risus. Vivamus imperdiet hendrerit ornare.

Верстка Полиграфии, WEB sites

Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Phasellus rutrum, libero id imperdiet elementum, nunc quam gravida mi, vehicula euismod magna lacus ornare mauris. Proin euismod scelerisque risus. Vivamus imperdiet hendrerit ornare.

Книжная лавка

Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Phasellus rutrum, libero id imperdiet elementum, nunc quam gravida mi, vehicula euismod magna lacus ornare mauris. Proin euismod scelerisque risus. Vivamus imperdiet hendrerit ornare.

И.С. Бейшова,  (К.с.-х.н., доцент, Костанайский государственный университет им. А. Байтурсынова, г. Костанай, Республика Казахстан)

Е.В. Белая,  (К.б.н., н.с., Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, Беларусь)

Б.Б. Траисов,  (Д.с.-х.н., профессор, академик Каз.АСХН, академик КазНАЕН, директор департамента животноводства НАО "Западно-Казахстанский аграрно-технический университет им. Жангир хана)

В.А. Ульянов,  (Н.с., преподаватель, Костанайский государственный университет им. А. Байтурсынова, г. Костанай, Республика Казахстан)

Серия «Естественные и Технические науки» # ДЕКАБРЬ 2017
Аулиекольская порода
Отбор животных с предпочтительными генотипами, ассоциированными с признаками мясной продуктивности у крупного рогатого скота, не во всех случаях приносит такой значительный и скорый результат, как можно было бы ожидать. Многие авторы обращают внимание на необходимость совершенствования способов оценки фенотипических эффектов генетических маркеров [1-6]. В связи с этим, нами применен способ дополнительной оценки фенотипического эффекта генотипов для полиморфизмов, которые являются потенциальными генетическими маркерами продуктивности, в том числе и мясной продуктивности крупного рогатого скота [7].

Ключевые слова: Аулиекольская порода, казахская белоголовая порода, соматотропиновый каскад, фенотипический эффект, крупный рогатый скот.

 

Развитие животноводства на современном этапе невозможно без внедрения новых биотехнологических методов оценки признаков продуктивности сельскохозяйственных животных, базирующихся непосредственно на анализе наследственной информации. Большая часть хозяйственно ценных селекционных признаков имеет полигенный характер, т.е. контролируется множеством генов. Поэтому в настоящее время в странах с развитой экономикой бурное развитие получило новое направление селекции, опирающееся на информацию о генотипах живых организмов - маркер-зависимая селекция (Marker Assisted Selection - MAS [8]. Маркеры, тесно сцепленные с целевым геном, являются надежным инструментом для предсказания фенотипа. Это позволяет производить оценку генетического потенциала животного сразу после рождения и сократить временные и финансовые затраты в селекционном процессе.

Известно, что гормон роста (GH – соматотропин) является важнейшим регулятором роста у млекопитающих. Синтез соматотропина и реализация его физиологических эффектов представляет собой цепь последовательных взаимодействий белок – рецептор (соматотропиновый каскад). Ключевыми звеньями этой цепи являются гипофизарный фактор транскрипции-1 (bPit-1), запускающий экспрессию генов соматотропина и пролактина, пролактин и гормон роста, регулирующие лактацию, рецептор гормона роста (bGHR), передающий гуморальный сигнал соматотропина к клеткам-мишеням [9].

Гены соматотропинового каскада полиморфны. У крупного рогатого скота разных пород выявлен широкий набор их аллелей, представляющих интерес для MAS-селекции в качестве генетических маркеров хозяйственно полезных признаков. Однако, в ряде случаев опубликованные данные об ассоциации аллелей генов соматотропинового каскада (bPit-1, bGH, bGHR и bIGF-1) с признаками продуктивности, полученные на разных породах, трудно сопоставимы и противоречат друг другу, а для значительной части выявленных аллелей такие исследования не проводились.

Несмотря на большой объем информации, поступающей из зарубежных источников, о преимуществах использования генетических маркеров в селекции, в отечественной научной литературе имеется лишь незначительная информация о подобных результатах. Информация о генетических маркерах мясной продуктивности у отечественных пород чрезвычайно важна, так как именно местные породы хорошо адаптированы к условиям климата, кормовой базе и обладают устойчивым иммунитетом к заболеваниям, распространенным на территории Казахстана.

Материалы и методы исследований

Объектом исследования послужили выборки коров Аулиекольской породы. Предмет исследования – полиморфные гены соматотропинового каскада (bPit-1, bGH, bGHR).

Материал исследования – образцы ДНК, выделенной из крови коров Аулиекольской породы. Геномную ДНК выделяли из крови КРС, используя набор «Pure Link Genomic DNA Kits», согласно инструкции изготовителя.

Определение генотипов животных осуществлялось методом ПЦР-ПДРФ. Последовательности праймеров и условия ПЦР для анализа каждого полиморфизма приведены в табл. 1.

Таблица 1.

Условия ПЦР и последовательности праймеров.


Ген/рестриктаза


Условия амплификации


Последовательности праймеров

bPit-1-HinfI

94 °С – 1 мин; (95 °С – 45 cек; 56 °С – 60 cек; 72 °С – 60 cек)
х 35 циклов; 72 °С – 1 мин

HinFI-F: 5′-aaccatcatctcccttctt-3′
HinFI-R: 5′-atgtacaatgtcttctgag-3′

bGH-AluI

95 °С – 5 мин; (95 °С– 30 cек; 64 °С – 30 cек; 72 °С – 60 cек)
х 35 циклов; 72 °С – 1 мин

AluI –F: 5′-ccgtgtctatgagaagc-3′
AluI-R: 5′′-gttcttgagcagcgcgt-3′

bGHR-SspI

95 °С – 5 мин; (95 °С– 30 cек; 60 °С – 30 cек; 72 °С – 30 cек)
х 35 циклов; 72 °С – 1 мин

SspI-F: 5′-atatgtagcagtgacaatat-3′
SspI-R: 5′-acgtttcactgggttgatga-3′

 

Полимеразную цепную реакцию генов проводили в амплификаторе ProFlex PCR System, «Applited Biosystems».  Детекцию ПЦР-продуктов проводили в 2%-ом агарозном геле. По 10 мкл каждого амплификата вносили в лунки геля. В каждом ряду присутствовал ДНК-маркер молекулярных масс. Подключали камеру к источнику тока, соблюдая полярность (молекулы ДНК движутся к положительному электроду). Проводили электрофорез в течение 30 мин. при напряжении электрического поля - 10 В / см, 150V. Документацию продуктов ПЦР амплификации проводили с помощью компьютерной системы Quantum 1100, Vilber Lourmat (США) под коротковолновым ультрафиолетовым излучением на трансиллюминаторе.

Анализ полиморфизма нуклеотидной последовательности гена bPit-1 в экзоне 6 проводился с помощью рестриктазы HinfI. Полиморфизм обусловлен A→G нуклеотидной заменой, не приводящей к изменению аминокислотной последовательности. Сайтом узнавания для рестриктазы HinfI является последовательность G↓ANTC. Разрезаемый в ходе ферментации фрагмент содержит нуклеотид А соответствующий аллелю bPit-1-HinfI В. В случае присутствия G нуклеотида сайт рестрикции исчезает, такой аллель обозначен как bPit-1-HinfI A.

Анализ полиморфизма нуклеотидной последовательности гена bGH в экзоне 5 проводился с помощью рестриктазы AluI. Полиморфизм обусловлен транзицией C→G. Сайтом узнавания для рестриктазы AluI является последовательность АG↓CТ. Распознаваемый ферментом аллель содержит нуклеотид С и обозначен как bGH-AluI L. В случае присутствия G нуклеотида сайт рестрикции исчезает, такой аллель обозначен как bGH-AluI V.

Анализ полиморфизма нуклеотидной последовательности гена bGHR в экзоне 8 проводился с помощью рестриктазы SspI. Рестриктаза SspI распознает Т→А транзицию в экзоне 8. Сайтом узнавания для рестриктазы является последовательность ААТ↓АТТ. Разрезаемый ферментом амплификат содержит нуклеотид Т, соответствующий аллелю bGHR-SspI F. В случае присутствия A-нуклеотида сайт рестрикции исчезает, такой аллель обозначен как bGHR-SspI Y.

Статистическая обработка результатов исследования проведена с использованием стандартного пакета программ «STATISTICA 6.0». Cравнение выборок по распределению частот аллелей исследуемых генов, а также оценку соответствия фактического распределения генотипов теоретически ожидаемому по закону Харди-Вайнберга проводили с помощью критерия χ2. Различия во всех случаях рассматривались как статистически достоверные при уровне значимости Р <0,05 [10].

Результаты исследований

Нами было установлено достоверное различие групп коров аулиекольской породы с генотипами bPit-1-HinFIАА, bPit-1-HinFIАВ и bPit-1-HinFIВВ по полиморфизму гена гипофизарного фактора роста-1 по признаку живая масса в возрасте 18 и 24 месяца. В частности, установлено, что большим весом характеризовались коровы с генотипом bPit-1-HinFIАА по сравнению с коровами с генотипами bPit-1-HinFIАВ и bPit-1-HinFIВВ.  В таблице 2 приведены численные значения живой массы аулиекольских коров в возрастах 18 и 24 месяца.

Таблица 2.

Непараметрические характеристики живой массы в группах коров аулиекольской породы
с разными генотипами по полиморфизму bPit-1-HinFI


Признак/возраст


генотип


Ме


Доверительный интервал для медианы


Интерквартильный размах

ДИ1

ДИ2

25%

75%

Живая масса;
возраст 18 мес.

bPit-1-HinFIАА

386

372

411

370

419

bPit-1-HinFIАВ

374

368

378

329

393

bPit-1-HinFIВВ

368

354

374

329

387

Общая выборка

373

368

377

329

395

Живая масса;
возраст 24 мес.

bPit-1-HinFIАА

447

410

482

403

483

bPit-1-HinFIАВ

383

376

411

365

428

bPit-1-HinFIВВ

411

403

423

382

435,5

Общая выборка

405

395

423

377

437

 

По данным, приведенным в таблице построены графики, характеризующия положение групп относительно общей выборки, рис. 1.

Читать полный текст статьи …


СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Boichard, D. Implementation of marker – assisted selection: practical lessons from dairy cattle / D. Boichard [et al.] // 8th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production, August 13 – 18. – 2006 / Belo Horizonte M. G. Brasil, 2006. – Vol. 34. – P. 186.
2. Chamberlain, A. J. Testing marker assisted selection in a real breeding program / A. J. Chamberlain, M. E. Goddard // 8th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production, August 13 – 18. – 2006 / Belo Horizonte M. G. Brasil. – 2006. – Vol. 34. – P. 184.
3. Goddard, M. E. Can the same genetic markers be used in multiple breeds? / M. E. Goddard [et al.] // 8th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production, August 13 – 18. – 2006 / Belo Horizonte M. G. Brasil. –2006 Vol. 34. – P. 191.
4. Thomsen, H. The choice of phenotypes for use of marker assisted selection in dairy cattle / H. Thomsen // 8th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production, August 13 – 18. – 2006 / Belo Horizonte M. G. Brasil. – 2006 Vol. 34. – P. 181.
5. Повышение белковомолочности крупного рогатого скота с использованием молекулярно-генетических маркеров: методические рекомендации / В.А. Солошенко [и др.]. – Новосибирск: Издательство ГНУ Сибирский НИИ животноводства Россельхоэакадемии, 2011. –32 с.
6. Edriss, V. Pit1Gene polymorphysm of Holstein Cows in Isfahan Province / V. Edriss, V. A. Edriss, H. R. Rahmani // Biotechnology. – 2008. – Vol. 7. – № 2. – P. 209 – 212.
7. Белая Е.В. Оценка индивидуального фенотипического эффекта полиморфных вариантов генов гипофизарного фактора роста-1 (bPit-1) и инсулиноподобного фактора роста-1 (bIGF-1) на признаки молочной продуктивности у черно-пестрого голштинизированного крупного рогатого скота / Е.В. Белая, М.Е. Михайлова, Н.В. Батин // Молекулярная и прикладная генетика: сб.науч.тр. – 2012. – Т. 13. – С. 30–35.
8. Никитин В.Я., Миролюбов М.Г. Ветеринарное акушерство и биотехника размножения. - М.: Колос, 2000. - С. 23-30.
9. Михайлова М.Е., Белая Е.В. Влияние полиморфных вариантов генов соматотропинового каскада bGH, bGHR и bIGF-1 на признаки молочной продуктивности у крупного рогатого скота голштинской породы // Доклады Национальной академии наук Беларуси. – 2011. – Т. 55. - № 2. – С. 63–69.
10. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О. Ю. Реброва. – Москва: «МедиаСфера», 2002. – 312 с.


©  И.С. Бейшова, Е.В. Белая, Б.Б. Траисов, В.А. Ульянов, Журнал "Современная наука: актуальные проблемы теории и практики".
 

 

 

  1. Комментарии (0)

  2. Добавить свои
There are no comments posted here yet

Оставьте свой комментарий

Posting comment as a guest.
Вложения (0 / 3)
Share Your Location
Введите текст с картинки. Не разобрать?
 
SCROLL TO TOP

������ ����������� Rambler's Top100 �������@Mail.ru