Целенаправленная химическая модификация природных биологически активных соединений приводит в ряде случаев к получению веществ, которые обладают более широким спектром действия и низкой токсичностью [9].

Суммарные препараты березы были включены еще в первые русские фармакопеи, однако с лечебной целью из березы получали только деготь и применяли ее почки. В последние годы, когда береза все больше вовлекается в химическую переработку, ее экстрактивные вещества исследуют в более широком аспекте. Василенко Ю.К. с соавторами (2008) сообщает, что одним из основных продуктовпереработки бересты березы является бетулин, который представляет собой биологически активное вещество.

Биологическая активность, как самого экстракта бересты, так и его компонентов, подтверждена в ходе научных исследований более чем в 40 зарубежных и российских научных центров. В медицине, при доклинических и клинических испытаниях бетулин проявил самые разнообразные свойства: антисептическое, бактериостатическое и бактерицидное против кишечных бактерий Esherichia coli, Salmonella typhi, Shigella flexure и Staphylococcus aureus, гепатопротекторную активность, антигипоксическое, антимутагенное, превентивное в отношении туберкулеза действия. Кроме того иммуномодуляторная способность бетулина проявляется в индуцировании выработки интерферона в организме, а также в повышении клеточного и гуморального иммунитета. Он  усиливает  активность некоторых иммунокомпетентных клеток, в частности количественные и качественные показатели фагоцитоза: увеличивает число фагоцитов, их функциональную  способность разрушать вирусы и бактериальные клетки. Таким образом,  бетулин повышает собственные защитные силы организма, облегчает течение болезни, не даёт развиться осложнениям, благодаря чему он сам справляется с болезнями [8].

В связи с этим изучение свойств бетулина приобретает особую актуальность применительно к ветеринарии как средство профилактики и лечения инфекционных болезней животных, особенно молодняка. По данным мониторинга эпизоотической ситуации в разрезе отдельных регионов России заболеваемость молодняка сельскохозяйственных животных респираторными и желудочно-кишечными болезнями инфекционного характера за последние годы имеет тенденцию к нарастанию, при этом снижается эффективность терапевтических мероприятий [3]. Указанные болезни носят факторный инфекционный характер и проявляются в виде ассоциативных инфекций с участием условно патогенной микрофлоры, а также вирусов, хламидий, микоплазм, лептоспир, листерий, кампилобактеров и др. [1,4,6,7,10].

Одним из основных способов борьбы с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных и птиц является их иммунизация специфическими вакцинами. Однако, в настоящее время в животноводстве еще недостаточно ассоциированных вакцин для профилактики сразу нескольких болезней [7,11]. В связи с этим требуются альтернативные неспецифические средства решения этой проблемы, к числу которых следует отнести экологически чистые препараты растительного происхождения.

Одними из таких препаратов является изготовленный на базе кафедры химии  ФГБОУ ВО ОмГУ им. Ф.М. Достоевского ( д.х.н., профессора Кулакова И.В.) - бетулин 80-95% очистки, который был получен из коры березы (бересты), собранной в Омской области, методом экстрагирования в аппарате Сокслета и последующей перекристаллизации до чистоты 95%, установленной по данным газо-жидкостной хроматографии. На основе бетулина высокой очистки (80-95%) были изготовлены  Бетулин-комплексный химический препарат  (БКХП), бетулоновая кислота,  Бетулин-Э и Бетулин-ПЭГ (0,25% суспензия в полимере-наполнителе).

Известно пероральное применение бетулина в ветеринарии в качестве БАД «Бетулин-экстракт» собакам служебных пород при кормлении их готовым сухим рацио­ном [5], улучшения пищеварения и нормализации обмена веществ; для повышения резистентности организма к не­благоприятным факторам воздействия внешней среды у животных, при лечении телят, инфицированных вирусом ИРТ и ПГ-3 [12]. Установлено, что препарат обладает хорошей антибактериальной, антивирус­ной и иммуностимулирующей активностью. Задают «Бетулин-экстракт» жи­вотным индивидуально с питьевой водой, молозивом, обратом или молоком. Недостатком лечения и профилактики является введение препарата внутрь с кормом, что не позволяет полностью использовать препарат, а также более длительный период перебо­левания (табл. 1).

В связи с этим возникает необходимость создания на основе бетулина новых препаратов аналогичного механизма действия и способов их парентерального применения для повышения их эффективности.

Объекты и методы

Применение бетулина в качестве средства для профилактики и лечения животных с симптомами респираторных и желудочно-кишечных болезней, обусловленных хламидиями, лептоспирами, кампилобактериями, эшерихиями, листериями, микоплазмами, кок­ками, сальмонеллами, коксиеллами и вирусами ИРТ, респираторно-синцитиальной инфекции, коронавирусом и другими инфекционными агентами, было изучено в эксперименте на телятах и поросятах. Для диагностики использовали эпизоотологические, клинические и лабораторные методы. Для индикации и идентификации возбудителей применяли серологические (РНИФ, РПИФ) и бактериологические методы диагностики.

В экспериментах на животных испытывали препараты Бетулин-Э и Бетулин-ПЭГ. последний изготавливали по авторской методике, направленной на получение жидкой формы препарата, которая при парентеральном введении минуя пищеварительный тракт, способствует более полному  использованию его полезных свойств для профилактик и лечения при ассоциативных и смешанных инфекционных болезней животных.

Изготовленный нами Бетулин-ПЭГ  представляет собой 0,25% суспензию для подкожного введения. Лечение крупного рогатого скота с симптомами желудочно-кишечных и респираторных заболеваний смешанной этиологии с применением Бетулина -ПЭГ в сочетании с антибиотиками широкого спектра действия осуществляли один раз в 2-3 дня, препарат вводили подкожно в дозе 0,2 мл/кг массы тела животного. Курс лечения состоял из 2-4 введений с интервалом в 3 дня. С профилактической целью Бетулин-ПЭГ вводили в той же дозе двукратно с интервалом 3 дня.

Изучение противомикробного и иммуностимулирующего действия препаратов Бетулина-Э и Бетулина-ПЭГ в условиях хозяйства, объектом исследования служили телята в возрасте 1-3 месяцев в количестве 27 голов, у которых до лечения регистрировали расстройство функции желудочно-кишечного тракта (диарея), поражения верхних дыхательных путей (истечения из носовой полости слизистого и слизисто-гнойного характера, кашель, жесткое дыхание, сухие и влажные хрипы в легких), глаз (катаральные и гнойные  конъюнктивиты), суставов (отеки, припухлости). Наличие антигенов-возбудителей инфекционных болезней в биоматериале и гомологичных антител в сыворотке крови от телят определяли путем постановки реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), которую ставили по общепринятым методикам с использованием специфических монорецепторных сывороток, вакцинных антигенов и антивидовых люминесцентных сывороток (ВНИИЭМ им. Гамалеи).

Результаты исследования

При исследовании биоматериала (бронхоальвеолярная слизь, сыворотка крови, пробы фекалий и слизи из прямой кишки) от больных телят выявлено ассоциативное течение инфекционного процесса поли­этиологической природы, обусловленное кампилобактериями, листериями, хламидиями, микоплазмами, эшерихиями, коксиеллами и вирусом ИРТ в различных сочетаниях. При этом данные прижиз­ненных исследований подтверждены результатами исследования патологического материала от погибших телят, от которых были выделе­ны хламидии - в 50% случаев; лептоспиры, кампилобактерии, эшерихии - в 33% случаев; листерии, микоплазмы, кокки, сальмонел­лы, коксиеллы и вирус ИРТ - в 17% случаев.

В сравнительном аспекте в контролируемых производственных опытах нами бы­ли испытаны  схемы лечения больных телят с учетом всех сочленов ассоциации микроорганизмов, участвующих в инфекционном про­цессе. В схемах лечения больных животных применяли комплексные антибактериальные препараты в сочета­нии с препаратами Бетулин-Э (пероральное применение) и Бетулин-ПЭГ (парентеральное применение). Контроль эффективности лечения проводили по результатам клинического (по клиническим симптомам болезни) и лабораторного (РНИФ, РПИФ) исследований.

Таблица 1.

Схемы лечения телят при ассоциативных инфекционных болезнях.

После лечения телят первой опытной группы с применением Левотетрасульфина и Бетулина-Э  у 14% телят в биоматериале сохранились антигены трех возбудителей - ИРТ, микоплазмоза и кампилобактериоза. Эффективность выздоровления составила 71%. Клинические проявления  болезни у телят первой опытной группы (Левотетрасульфин в сочетании с  Бетулин-Э) исчезли у всех животных.

Бетулин-Э в сочетании с левотерасульфином значительно ранее купировал симптомы поражения органов дыхания (отек носовых ходов, уменьшение количества бронхиальной слизи, кашель),  и пищеварения (в среднем на третьи сутки), чем при использовании одного левотерасульфина.

В биоматериале, отобранном после лечения у телят второй и третьей  опытных групп (левотетрасульфин или тетрациклин в сочетании с подкожным введением Бетулина-ПЭГ) отсутствовали антигены возбудителей инфекционных болезней, тогда как у телят контрольных, которым Бетулин-ПЭГ не применяли, обнаружены антигены возбудителей инфекций: хламидиоза и лептоспироза у 20%, диплококкоза у 20-60% и ИРТ у 20%. При исследовании патологического материала обнаружены антигены возбудителей пастереллеза, диплококкоза и ИРТ. Эффективность выздоровления телят опытных групп, которым, наряду с антибактериальными препаратами (левотерасульфин, тетрациклин) вводили Бетулин-ПЭГ подкожно,  составила 100%,  а с применением одного левотетрасульфина или тетрациклина этот показатель был на 60% ниже.

Препарат Бетулин-ПЭГ при подкожном введении, в сочетании с антибактериальными препаратами левотетрасульфином и тетрациклином купирует симптомы поражения органов дыхания и пищеварения, снимает воспалительные явления в области суставов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Одним из актуальных направлений в науке по проблеме ассоциативных инфекционных болезней является изыскание, а также изучение и внедрение иммунокорректирующих организм животных препаратов.

Нами, с целью лечения больных телят с симптомами поражения органов дыхания, пищеварения и репродукции, разработаны и апробированы рациональные схемы с применением левотетрасульфина и тетрациклина в сочетании с Бетулином-Э и Бетулином-ПЭГ.

В ходе экспериментов нами была получена новая форма препарата Бетулин-ПЭГ  для парентерального введения.  Его преимущества заключаются в снижении потери активного вещества (попадая в организм, оно минует защитные барьеры организма - желудочно-кишечный тракт и печень, где под влиянием ферментов оно может претерпевать изменения и разрушаться); в высокой эффективности воздействия на организм (быстрота всасывания);  в уменьшении  трудоемкости врачебных манипуляций (двукратное введение с интервалом 3-х суток) и  в повышении эффективности лечения и в снижении сроков переболевания телят.

Установлено, что эффективность выздоровления телят при терапии левотетрасульфином с Бетулином-Э (per os) составила 100%, одним левотетрасульфином - 71% (при этом погибло 2 теленка), а при терапии больных телят с применением традиционных схем лечения, применяемых в хозяйстве -29% (погибло 3 теленка).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Басова Н.Ю. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота инфекционной этиологии в условиях Северного Кавказа: автореф. дис. … д-ра вет. наук:16.00.03. / Наталья Юрьевна Басова. – Краснодар, 2002. 114 с.
2. Василенко Ю.К., Семенченко В.Ф. Фармакологические свойства тритерпеноидов коры березы/Ю.К. Василенко, В.Ф. Семенченко // Экспериментальная и клиническая фармакология. –1993. – № 4. – С. 53–55.
3. Гаффаров Х.З., Иванов А.В., Непоклонов Е.А. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят / Х.З. Гаффаров, А.В. Иванов, Е.А. Непоклонов. – Казань: ФЭН, 2002. – 592 с.
4. Глотов А.Г. Особенности эпизоотической ситуации по вирусным респираторным болезням крупного рогатого скота в Сибири / А.Г. Глотов [и др.], РАСХН, ИЭВС и ДВ. // Актуальные проблемы ветеринарного обеспечения животноводства Сибири. – Новосибирск, 2006. – С. 52–56.
5. Голдырев А.А. и др. Бетулин и его влияние на состояние здоровья собак // Аграрная наука. - 2007. - №11. - С. 26-28
6. Жидков С.В. О современной профилактике желудочно-кишечных и респираторных вирусных инфекций телят /С. В. Жидков [и др.]//Ветеринария сельскохозяйственных животных. – 2010. – № 4. – С.12.
7. Задорожная М.В. Эффективность применения бетулина в птицеводстве / М.В. Задорожная, С.Б. Лыско, А.П. Красиков // Ветеринарный врач. – 2012. – № 5. – С. 34-36.
8. Кветков В.П. Экологические иммунные препараты для ветеринарии и медицины / В.П. Кветков. – Курган, 1992. – С. 176.
9. Кислицын А.Н. Экстрактивные вещества бересты: выделение, состав, свойства, применение/А.Н. Кислицын // Химия древесины. – М.: Химия, 1994. – 361 с.
10. Лыско С.Б. Влияние бетулина на естественную и специфическую резистентность птиц / С.Б. Лыско, А.П. Красиков, М.В. Задорожная // Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых: Тр. IV Междунар. науч. конф. молодых ученых, посв. 40-летию СО Россельхозакадемии (22-23 апреля 2010 г., пос. Краснообск) / СО РАСХН. – Новосибирск, 2010. – Ч. I. – С. 591–593.
11. Шкиль H.A. Экология условно-патогенной микрофлоры, циркулирующей в популяции животных/ H.A. Шкиль [и др.]. // Сиб. вестн. с.-х. науки. -2003.-№ 3.-С. 163-164.
12. Щегловитова О.Н. и др. Влияние бетулина на систему интерферона у крупного рогатого скота при ИРТ // РВЖ СХЖ. - 2007. - № 1.- С. 31-33